质粒转化的目的

质粒转化的目的 什么是转染?为什么要质粒转染?

什么是转染?为什么要质粒转染?

什么是转染?为什么要质粒转染?

转染(transfection):指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。

转染目的:研究你的目的片段到细胞内的表达。

转染一般是将目的基因构建到某个载体,将构建好的重组质粒导入细胞中,这样就能表达你所要的目的蛋白用于后续实验。

什么是转染?为什么要质粒转染?

转染:指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。

转染目的:研究你的目的片段到细胞内的表达。

转染一般是将目的基因构建到某个载体,将构建好的重组质粒导入细胞中,这样就能表达你所要的目的蛋白用于后续实验。

农杆菌转化法的原理?

农杆菌转化法的原理是构建双元表达载体系统,由两种质粒组成,一种是位于大肠杆菌中的穿梭质粒,另一种是位于农杆菌中的辅助性质粒。

将重组质粒电转化到农杆菌感受态细胞中后,用含有重组质粒的农杆菌去侵染植物根部切口,通过辅助性质粒的Vir区表达蛋白与重组质粒T-DNA区的反式作用激活T-DNA的转移,从而将目的片段整合到植物细胞基因组中。随着愈伤组织的形成,使得新生细胞均含有该目的片段的基因。

扩展资料:

农杆菌Ti质粒转化系统与其他基因转化体系相比,具有许多突出的优点:

1、该转化体系是模仿或称之为利用天然的转化载体系统,成功率高,效果好;

2、农杆菌Ti质粒转化系统的机理研究得最清楚,方法最成熟,应用也最广泛;

3、农杆菌Ti质粒转化系统转化的外源基因以单拷贝为多数,遗传稳定性好,并且多数符合孟德尔遗传规律,因此转基因植株能较好地为育种提供了中间选育材料;

4、农杆菌Ti质粒转化系统操作比较容易,需要的仪器设备简单,易于推广。

农杆菌转化法的原理?

又名农杆菌Boletus介导转化法。农杆菌转化法 根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti(Tumourinducing)质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA(TransferringDNA),农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代,这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。科研人员将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后通过细胞和组织培养技术,再生出转基因植株。农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中,近年来,农杆菌介导转化在一些单子叶植物(尤其是水稻)中也得到了广泛应用